ADN recombinante en la Naturaleza y este dentro de las enfermedades cardiacas

En la naturaleza

Los virus bacterianos (bacteriófagos) añaden una serie de moléculas, como azúcares, aminoácidos y poliaminas, a las nucleobases de su ADN genómico para eludir las defensas basadas en endonucleasas de sus huéspedes. Estas hipermodificaciones del ADN se forman a través de vías biosintéticas como la 5-(2-aminoetil)uridina que sustituye al 30% de la timidina en el ADN del fago M6 de Pseudomonas. (1)

ADN Y PROTEINAS RECOMBINANTES 

T: El péptido natriurético de tipo B mejora los efectos fibróticos a través de la expresión de la metaloproteinasa 2 de la matriz en la aurícula del ratón in vivo y en miofibroblastos auriculares humanos in vitro

O:  Investigar los efectos directos del péptido natriurético de tipo B en ratones con fibrosis auricular inducida por TNF-α, así como sus efectos sobre los miofibroblastos auriculares humanos. 

G: Secuencia de glutatión S-transferasa (GST) 

ER: No especifica

EL: No especifica 

V: Vector de expresión pGEX-5X-1-humna BNP.

CR: Miofibroblastos auriculares humanos

MTG:  Cultivo ayudado con 0,1 mM de 3-isobutil1-metilxantina (un inhibidor no específico del monofosfato de adenosina monofosfato (AMP)

MIC: 

(A) RT-PCR para identificar la expresión de ARNm de NPR-A. La activación intracelular se analizó mediante un kit ELISA competitivo de GMPc. 

(B) Se analizó el nivel de MMP-2 mediante análisis de Western Blot y la densidad de cada banda se cuantificó mediante densitometría 

(C) Se analizo 2 mg de proteína concentrada por zimografía de gelatina. Se utilizó la tinción con azul brillante de Coomassie como control de carga. La densidad se cuantificó mediante densitometría 

Bibliografía:

1. Lee Y-J, Dai N, Walsh SE, Müller S, Fraser ME, Kauffman KM, et al. Identificación y biosíntesis de hipermodificaciones de timidina en el ADN genómico de virus bacterianos generalizados. Actas de la Academia Nacional de Ciencias [Internet]. 19 de marzo de 2018 [citado el 24 de julio de 2021]; 115 (14): E3116-25. Disponible en: https://www.pnas.org/content/115/14/E3116.short

ADN RECOMBINANTE 

2. Tsai Y-T, Lin F-Y, Lin C-S, Loh S-H, Li C-Y, Lin C-Y, et al. El péptido natriurético de tipo B mejora los efectos fibróticos a través de la expresión de la metaloproteinasa-2 de la matriz en la aurícula del ratón in vivo y en miofibroblastos auriculares humanos in vitro. Investigación traslacional [Internet]. Junio de 2019 [citado el 4 de agosto de 2021]; 208: 30–46. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30857762/

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